miércoles, 30 de julio de 2014

DIABETES MELLITUS Y CÁNCER

LA DIABETES MELLITUS Y EL CÁNCER

La Diabetes Mellitus es ahora un problema de salud global común y grave.
Existe una estrecha relación entre la Diabetes Mellitus y el cáncer, ya que ambas son influenciadas tanto por factores genéticos como ambientales.

Se ha observado que muchos pacientes con diabetes presentan además cáncer de mama, hepático, pancreático, de tracto urinario, de endometrio y colorrectal, pero parece que ejerce un efecto protector contra el cáncer de próstata.

Hay mecanismos comunes entre ambas patologías como la hiperinsulinemia que aumentan el riesgo de cáncer en personas sanas incrementando los casos de obesidad-cáncer; la inflamación crónica sistémica también puede resultar en ciertas condiciones protumorigénicas.


REFERENCIA:



domingo, 27 de julio de 2014

Universidad Central del Ecuador
Facultad de Ciencia Médicas - Medicina
Biología Molecular
Mecanismos Moleculares:



domingo, 20 de julio de 2014

TERAPIA GÉNICA Y CELULAR

La terapia génica, consiste en el tratamiento y alivio de las enfermedades genéticas humanas mediante la adición de genes silvestres exógenos para corregir la función defectuosa de las mutaciones. En los seres humanos puede utilizarse dos tipos básicos de terapia génica: la somática y la germinal.

En los últimos años, se ha intentado encontrar un tratamiento más directo y eficaz para los pacientes que padecen de diabetes mellitus, que se están medicando a base de inyecciones con insulina sintética. 

En el caso de la diabetes tipo 1 o insulino-dependiente, se trata de introducir el gen glut-1 que favorezca la síntesis de insulina en las células beta del páncreas, y evitar que estas sean destruidas por el sistema inmune. 

En la diabetes tipo 2 o insulino- no dependiente, se intenta que la leptina interfiera disminuyendo en el apetito además de la hiperinsulinemia. 

Los tratamientos están basados en la ingeniería de células madre del páncreas de la línea beta y también con células madre adultas obtenidas del cordón umbilical.

 

                             

REFERENCIA:



terapia genica by Anthony Caldwell

domingo, 13 de julio de 2014

ARTÍCULO STEM CELLS

TEMA:
Trasplante de células secretoras de insulina humana diferenciada de las células madre derivadas de tejido adiposo en ratones con diabetes tipo 2.

OBJETIVO:
Explorar el potencial de los tejidos derivados de células madre obtenidas del tejido adiposo, que se van a diferenciar en islotes funcionales como agregados de células.

TIPO DE STEM CELLS:
Células madre de tejido adiposo

CÓMO FUE OBTENIDO:
1. Liposapiración
2. Cultivo
3. Inmunocitoquímica
4. Análisis de citometría de flujo
5. RT-PCR

APLICACIONES CLÍNICAS:
Disminuir los valores de hiperglucemia mediante la restauración de los niveles normales de insulina circulante.
Atenuación de los trastornos metabólicos a través de un efecto anti-inflamatorio.

VENTAJAS:
1. Las células madre son células que tienen la capacidad de autoreplicarse a través de sucesivas divisiones celulares a lo largo de toda la vida del individuo.
2. Son de fácil obtención en clínicas de fertilización.
3. Tienen la capacidad de diferenciarse para dar origen, según las circunstancias a las que se enfrenten y las señales químicas que reciban, en células especializadas.
4. Estas células son las más eficaces para los trasplantes, ya que no presenta problemas de aloinjertos.
5. No es necesario que sean sometidas a pruebas de aceptación inmunológica.

DESVENTAJAS:
1. Una vez que las células madre se diferencian, pierden su capacidad de autoreplicarse.
2. Al tratarse de células generalmente obtenidas de embriones, ha causado una serie de problemas éticos, ya que estos se deben desintegrar.
3. Se requiere de rigurosos métodos de seguridad para asegurar la salud a largo plazo de las células a trasplantar.
4. No se conoce cuál es la edad biológica exacta para el proceso de transferencia del núcleo somático.
5. En ciertas ocasiones, estas células pueden mutar y causar serias enfermedades.

                                


viernes, 4 de julio de 2014

TRANSGÉNICO

Antes, a los diabéticos se les administraba insulina de cerdos y vacas, que un pesar de 
ser muy parecidas a la insulina humana, los aminoácidos eran ligeramente diferentes 
y algunos diabéticos los consideraban extraños. Esto provocaba una reacción inmune 
en contra de la insulina, que producía reacciones adversas como alergias y terminaba 
siendo ineficaz.
Una de las vacas transgénicas que se creó fue Patagonia, la cual poseía en su leche el 
precursor de la insulina humana. 
Según el Ministro de Salud de Argentina, este descubrimiento podría solucionar las 
necesidades de los diabéticos argentinos.


Actualmente, la insulina humana transgénica puede obtenerse de bacterias como E.coli
o levaduras de pan, que al ser de nuestra propia especie, no causa efectos adversos. Su 
obtención es mucho más rápida y eficiente, por lo que el precio del medicamento 
disminuyó considerablemente.



VENTAJAS
* La insulina humana transgénica es de fácil producción
• Se puede obtener una gran cantidad de la hormona en poco tiempo.
• No provoca reacciones alérgicas.
• Da resultados satisfactorios.
• Es de bajo costo.

DESVENTAJAS
* No se han reportado efectos adversos de la de insulina transgénica humana, aparte de 
algunos casos de los episodios hipoglucémicos.
Muchas personas consideran a los transgénicos como dañinos, pero no estos no 
son ni buenos ni malos por sí mismos, sino que depende de la intencionalidad de su 
aplicación.

REFERENCIAS:

sábado, 28 de junio de 2014

ADN RECOMBINANTE Y DIABETES MELLITUS

ADN recombinante es una forma de ADN artificial que proviene de la unión de dos fragmentos de ADN, de manera que un organismo (animal, vegetal, bacteria, hongo) o un virus pueda producir una proteína que le sea totalmente extraña.

Estas técnicas se emplean para la síntesis de proteínas en gran escala, ya que podemos hacer que una bacteria produzca una proteína humana y lograr una superproducción, como en el caso de la insulina humana, que es elaborada por bacterias en grandes recipientes de cultivo, denominados biorreactores

Los pasos para su obtención son:

*  Se aisló y se cortó el gen productor de la insulina humana del resto de ADN humano.
*  Se insertó dicho gen en la bacteria Escherichia coli.
* Se potenció la multiplicación de las E. coli transgénicas que producían insulina en cultivos bacterianos para obtener un gran número de ellas.
*  De esa población de E. coli se extraía la insulina producida.

                                  


Hace algunos años, se fabricó gracias a la tecnología recombinante, la insulina inhalable que al alcanzar el espacio alveolar, atraviesa los neumocitos por transcitosis, y llega a la circulación sanguínea. 
Este medicamento llamado Exubera®, es una insulina de acción rápida humana producida por ADN recombinante en forma de polvo para ser inhalada, pero que fue retirada del comercio por su alto costo, y por ser menos eficaz que la insulina inyectable.

                              Esquema de funcionamiento de la terapia. (Imagen: Pfizer)

REFERENCIAS:

jueves, 19 de junio de 2014

OTRAS TÉCNICAS MOLECULARES

TÉCNICA ELISA

En los pacientes diabéticos, las células beta secretoras de insulina que se encuentran en los islotes pancreáticos, son agredidas por células del sistema inmune, generando autoanticuerpos específicos para dichas células beta. Estos autoanticuerpos se denominan  “marcadores”, y se reproducen antes de que la enfermedad se manifieste.


El método ELISA detecta los marcadores localizados en la sangre, a través de dos autoantígenos recombinantes llamados Trx-GAD e IA-2ic.



                       
                                                                                                 














MICROARRAYS DE EXPRESIÓN GÉNICA


El biochip o microarray de ADN, consiste en una serie de fragmentos de ADN que permiten el análisis simultáneo de miles de genes.
Las principales aplicaciones de los microarrays de ADN en salud humana son el seguimiento de la expresión génica, la búsqueda de compuestos activos, la medicina personalizada y la predicción de enfermedades.


Cuando se utiliza estos microarrays en el estudio de Diabetes Mellitus, se llevan a cabo de manera simultánea una gran cantidad de reacciones en el espacio de un portaobjetos de microscopía. Aquí se analiza el ARNm aislado de una muestra biológica para determinar el nivel de transcripción de la totalidad del genoma denominado transcriptoma.

                                           


ENZIMAS DE RESTRICCIÓN
Las enzimas de restricción o endonucleasas, son proteínas que reconocen secuencias concretas de ADN, y cortan sus enlaces fosfodiéster.

Son extraídas de bacterias, en las que actúan como un mecanismo de defensa ya que degrada el material genético extraño que entra en la célula.  
Las bacterias tienen la capacidad de metilar su ADN, permitiendo distinguir entre el ADN extraño y el propio, y como las enzimas de restricción no pueden cortar ADN metilado, solo afectan el ADN extranjero y no el ADN bacterial.


Dependiendo de la secuencia reconocida y el punto de corte, vamos a tener varios tipos: ADN polimerasa, ADN ligasa, transcriptasa inversa, fosfatasa alcalina.

                                   



REFERENCIAS:

http://www.agencia.mincyt.gob.ar/frontend/agencia/post/846

http://www.madrimasd.org/informacionidi/biblioteca/publicacion/doc/vt/vt5_nanomedicina.pdf
http://www.avpap.org/documentos/bilbao2006/genetica.htm
*http://www.uprm.edu/biology/cursos/biologiageneral/EnzimasDNA.htm

domingo, 15 de junio de 2014

EPIGENÉTICA Y LA DIABETES MELLITUS

La epigenética hace referencia al estudio de todos aquellos factores no genéticos, como los procesos químicos, que modifican la actividad del ADN pero sin alterar su secuencia de bases nitrogenadas.

La epigenética se puede observa en las células germinales, donde regiones regulatorias de ciertos genes son metiladas y expresadas de diferente manera dependiendo de si el gen heredado pertenece a la madre o al padre. 
Por ejemplo, los genes involucrados en casos de enfermedades neonatales raras de diabetes y en algunos sujetos con diabetes tipo 1 y 2 poligenética. 



Los hijos de madres mal nutridas durante la gestación, presentan una mayor sensibilidad para desarrollar resistencia a la insulina, o cuando se ven sometidos a un medio de excesos alimentarios, tienen mayor riesgo de padecer Diabetes Mellitus. 

Los efectos del parentesco, además de los estímulos ambientales, pueden incluir la herencia materna del genoma mitocondrial y los efectos maternos sobre el medio intrauterino.

                             

REFERENCIAS:




viernes, 6 de junio de 2014

ALTERACIONES EN LA TRADUCCIÓN



El dogma de la genética consiste en que el ADN de los genes se transcribe a ARN mensajero (ARNm) que después es traducido a proteínas.


Existen otras formas de ARN, como el ARN ribosómico (ARNr) o el ARN de transferencia (ARNt), que catalizan reacciones biológicas, controlan la expresión de genes o interaccionan con cascadas de señalización dentro de las células.

En los últimos años se ha descrito una nueva forma de ARN, el ARNlnc. Se trata de cadenas largas de ARN codificadas en el genoma, que no se traducen a proteínas y que se puede localizar en diferentes partes de la célula. Son por lo tanto genes fuera de los genes clásicos, ya que estos tradicionalmente se relacionan con la producción de proteínas. Su función todavía se desconoce, aunque se ha visto que los ARNlnc pueden llegar a ser muy específicos en diferentes tipos de tejidos y se han relacionado en algunos casos con cáncer, ciclo celular, el ensamblado de los ARNs o la regulación transcripcional.

              


REFERENCIAS:





viernes, 30 de mayo de 2014

ALTERACIONES EN LA TRANSCRIPCIÓN



Los factores de transcripción controlan amplios programas genéticos vinculados a la función celular y a la enfermedad.
Existe una interacción entre los factores de transcripción Hnf1α y Hnf4α, y su efecto sobre el desarrollo de diabetes.

La Diabetes  MODY se presenta debido a alteraciones en dichos factores de transcripción, los cuales cumplen un papel fundamental en el desarrollo y proliferación de las células beta del páncreas, así como su metabolismo funcional cuando ya son células maduras.
Los estudios moleculares ayudan a demostrar mutaciones en  estos factores, de donde se verá afectada la expresión del gen de la insulina o mutaciones en la enzima glucoquinasa, por lo tanto la producción de insulina será insuficiente o nula.








REFERENCIA:



domingo, 25 de mayo de 2014

ALTERACIONES EN LA REPLICACIÓN

Existe una mutación mitocondrial A3243G que afecta al gen que codifica el ARNt de la leucina (tARNLeu[UUR]) en genealogías con diabetes y sordera neurosensorial.
Este tipo de diabetes se caracteriza por afectar a adultos jóvenes, sin obesidad asociada, que presentan antecedentes familiares de diabetes materna y sordera neurosensorial. 
Inicialmente, se comportan como diabéticos no insulinodependiente (DMNID) que con frecuencia progresan con el tiempo a la insulinodependencia (DMID). La variabilidad clínica estará en relación con el grado de heteroplasmia o porcentaje de ADN mitocondrial mutado existente en los diferentes tejidos.
Principalmente estàn afectados los tejidos con mayor dependencia del metabolismo oxidativo, como la célula betapancreática, el sistema nervioso central (SNC) y el músculo esquelético.

La prevalencia estimada de esta entidad se sitúa entre el 0,5 y el 1,5% del total de diabetes.





sábado, 17 de mayo de 2014

ARTÍCULO DE PCR PARA DIABETES MELLITUS

Asociación del SNP19 del gen «calpaína 10» a diabetes mellitus tipo 2 y factores de riesgo en población peruana

La DM2 es una enfermedad genética compleja debido a su alta frecuencia, que se caracteriza por una resistencia a la insulina o su deficiente secreción, y en la que existe una interacción del medio ambiente y los genes.

El gen CAPN10, localizado en el 2q37.3 representa susceptibilidad para la enfermedad, por lo que se planteo que los SNP19, 43 y 63 del gen CAPN10 estaban relacionados a la DM2, detectándose mediante la técnica de PCR a partir del ADN de las muestras de varios pacientes.
A estos se los relacionó además con factores de riesgo como obesidad, IMC, HTG, HTA y HC.
La técnica de PCR utilizada para cada uno de los segmentos del gen CAPN10, permitió la práctica de su respectivo buffer de lisis. 


Como resultado se obtuvo que tanto en los pacientes diabéticos como los no diabéticos, el SNP19 se encuentra en equilibrio H-W. Después se tomó en cuenta la frecuencia alélica solo del SNP19 y se observó que el SNP19 del gen CAPN10 está asociado a DM2.



REFERENCIA